环丙沙星检测试剂盒样本前处理具体操作步骤
5 样本前处理
5.1 样本处理前须知:
实验器具必须洁净并使用一次性吸头,以避免污染干扰实验结果。
5.2 配液:
配液1:0.15M盐酸溶液
取5ml浓盐酸,加入去离子水中定容到400ml。
配液2:样本提取液
量取10ml 0.15M盐酸溶液(配液1)加入到90ml无水乙腈中混合均匀。
配液3:复溶液
将5×复溶液用去离子水5倍稀释,用于样本的复溶,复溶液在4℃环境可保存一个月。
5.3 样本前处理步骤:
5.3.1 动物组织(鸡肉、猪肉、鱼、虾)处理方法
1)称2.0±0.05g 均质过的组织样本于50ml离心管中;
2)加入8ml样本提取液(配液2),振荡5分钟,室温4000转/分离心10分钟;
3)取2ml清澈上层有机相至洁净干燥的10ml玻璃试管中,50-60℃水浴氮气吹干;
4)加入1ml正己烷,振荡2分钟,再加1ml复溶液(配液3),振荡30秒,室温4000转/分离心5分钟;
5)去除上层正己烷,取下层水相50µl液体用于分析。
样本稀释倍数:2 检测下限:0.3ppb
5.3.2 蜂蜜处理方法
1)取1.0±0.05g蜂蜜至50ml聚苯乙烯离心管中,加6ml样本提取液(配液2),振荡5分钟,使其充分溶解;
2)加入3ml复溶液(配液3),加入11ml二氯甲烷,振荡5分钟,室温4000转/分,离心5分钟;
3)吸去上层,取下层有机相8ml至干燥溶器中,50-60℃水浴氮气吹干;
4)用1ml复溶液溶解干燥的残留物,再加入正己烷1ml混合30秒,室温3000转/分以上,离心5分钟;
5)去除上层取下层50µl液体用于分析。
样本稀释倍数:2 检测下限:0.4ppb
5.3.3 牛奶处理方法:
1)取25µl样本液与475µl复溶液(配液3)混合,振荡1分钟,使其充分溶解;
2)取50µl液体用于分析。
样本稀释倍数:20 检测下限:3ppb
5.3.4 奶粉处理方法:
1)称取0.5±0.02g均质物至10ml聚苯乙烯离心管中,加入5ml去离子水,振荡,使其充分溶解;
2)取100µl样本液与400µl复溶液(配液3)混合,振荡1分钟;
3)取50µl液体用于分析。
样本稀释倍数:50 检测下限:6ppb
5.3.5 鸡蛋处理方法:
1)称取1.0±0.02g均质物至10ml聚苯乙烯离心管中,加入5ml去离子水,振荡,使其充分溶解;
2)取100µl样本液与400µl复溶液(配液3)混合,振荡1分钟;
3)取50µl液体用于分析。
样本稀释倍数:30 检测下限:3ppb