随着科技的发展，ELISA试剂盒被越来越多的用于疾病诊断、食品安全检测中。在ELISA试剂盒实验中，经常回遇到各种问题，好比说背景深，全部呈有色（通常的Elisa背景值OD<0.2），是什么原因导致的，如何应对？
根据技术分析，可能存在的原因有一下几条：
1、样品稀释液污染
解决办法：弃去稀释液，重新配置
2、吸头重复使用，未洗净或消毒不*
解决办法：吸头尽可能一次性使用
3、不正确的孵育时间，温度（尤其是底物孵育的时间）
解决办法：常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。*按照说明书要求
4、偶联抗体浓度过高
解决办法：按照说明书调整到合适的浓度
5、ELISA板子不正确的贮存
解决办法：酶标板贮存于2-8 ℃；使用结合力低点的Elisa板
6、实验过程中洗涤不充分，洗后未拍干，样品中其它成分残留或酶标记物残留
解决办法：洗液准确配制；充分洗涤，静置15秒，*拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用，不要反复使用，否则易造成污染。
7、底物污染，未避光保存，出现颜色
解决办法：弃去底物，重新配置
8、没有正确封闭
解决办法：在标准品稀释液中加入动物蛋白或延长封闭时间
9、样本溶血严重
解决办法：建议使用非溶血或轻微溶血样本，严重溶血样本会导致背景偏高。
