要完成一项漂亮的ELISA实验,不光要做足实验的准备,还要对其他各种辅助材料有所了解,这其中防腐剂的运用很重要,
ELISA试剂盒中常用的防腐剂有:
1.叠氮钠是HRP的抑制剂,凡是和HRP接触的试剂,一定不能用;
2.硫柳汞在ELISA试剂中可普遍使用,但因其有毒,较少使用;
3.市面许多试剂盒产品,用抗生素做防腐剂较多,如庆大。
4.如果试剂仅在实验室短期使用,其实并不需加防腐剂,常规试剂放4度冰箱,抗体、酶等加甘油分装冻存即可。
5.防污染可添加0.02%的叠氮钠,或0.01%的硫柳汞。叠氮钠在多数情况下有用且有效,但在有些实验中却不合适,因为它能阻断细胞的电子传递链,对许多生物体都有毒性,因此不能用于活体实验;因为含有氨基而能干扰许多标记方法;不能用于辣根过氧化物酶标记的抗体。而硫柳汞不含氨基,不影响基质的稳定性。如果将抗体应用于生物活性检测、体内实验,一般不使用任何防腐剂,这些实验用的抗体应少量分装冷存,切忌反复冻融。
6.吐温-20是作为稳定剂,可减少非特异性黏合。
7.甘油是防止冻融过程中的固-液相变而引起蛋白变性,能有效地增强蛋白质的稳定性,-20度冻存时甘油的浓度可以在20~30%。
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