人ELISA试剂盒检测原理:往预先包被肥胖抑制素抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的肥胖抑制素呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度,计算样品浓度。 人ELISA试剂盒使用规范:
1、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
2、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。
3、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。
5、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。
7、本试剂盒定量范围为0.1-200ng/ml,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(0.1-200ng/ml范围内),乘以总稀释倍数即为样本zui终浓度。
8、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。
9、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。