羊ELISA试剂盒作用的基本原理:抗原或抗体能吸附到固相载体表面,并保持其免疫学活性;抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,仍保持其免疫学和酶学活性;酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。
羊ELISA试剂盒使用的一些技巧:
1.血清:室温血液天然凝结10-20分钟,离心20分钟左右。细心搜集上清,保存过程中如呈现沉积,应再次离心。
2.血浆:应根据羊ELISA试剂盒的标本的要求挑选EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右,保存过程中如有沉积构成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管搜集,离心20分钟左右。细心搜集上清,保存过程中如有沉积构成,应再次离心。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管搜集。离心20分钟左右。细心搜集上清。检测细胞内的成份时,用PBS稀释细胞悬液,细胞浓度到达100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞损坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右。细心搜集上清。保存过程中如有沉积构成,应再次离心。
5.安排标本:切开标本后,称取分量。参加一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本消融后依然坚持2-8℃的温度。参加一定量的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充沛。离心20分钟左右。细心搜集上清。分装后一份待检测,其他冷冻备用。
6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行试验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应防止反复冻融.