ELISA试剂盒在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
ELISA试剂盒标本的重复冻融所发作的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子发作损坏作用,然后导致假阴性作用。
冻融标本的混匀亦应留心,不要进行剧烈振荡,重复倒置混匀即可。
标本在保存中如出现细菌污染所构成的的混浊或絮状物时,应离心堆积后取上清查看。
一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作符号的测定办法发作非特异性搅扰。
血清标本如是以无菌操作分别,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则主张冰冻保存。
ELISA试剂盒要留心避免出现严峻溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有相似过氧化物的活性。
在以HRP为符号酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很简单在温育过程中吸附于固相,然后与后边参加的HRP底物反响显色。
样本的搜集及血清分别中要留心尽量避免细菌污染,一则细菌的成长,其所排泄的一些酶或许会对抗原抗体等蛋白发作分解作用。