二磷酸腺苷(ADP)含量试剂盒HPLC法
二磷酸腺苷(ADP)含量试剂盒HPLC法
规格 : 50T/100T
测试方法:高效液相色谱法/HPLC
测定意义
二磷酸腺苷(ADP)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定ADP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。当一摩尔ATP分子的磷酸根水解断裂时,会产生一摩尔二磷酸腺苷分子,一摩尔磷酸根(Pi),并释放出7.3千卡(kcal)的能量。ADP存在于血小板细胞内的高密度颗粒内,当血小板发生凝聚反应时被释放,ADP通过血小板上的ADP受体对血小板的形状及生物学行为产生影响,进一步加速血小板的凝聚过程。
测定原理
ADP在254 nm下有吸收峰,可以利用高效液相色谱法测定其含量。
高效液相色谱法简介:
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用 。
高效液相色谱法具有“四高一广”的特点:
①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。
②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。
③高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到很好的分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
④高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。
⑤应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。
⑥柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物
⑦样品量少、容易回收:样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。
此外高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点。
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