一、禽白血病病毒检测试剂盒
二、通用名称:禽白血病病毒检测试剂盒 (实时荧光PCR法)
三、包装规格 50T/盒
四、预期用途:
适用于禽白血病病毒检测,可用于临床禽白血病病毒感染的辅助诊断,但不作确诊使用。
五、原理:
针对引起禽白血病的禽C型反录病毒群的病毒基因组高度保守区域设计特异性引物和探针,在反应体系中含禽C型反录病毒群的病毒基因组模板的情况下,PCR反应得以进行并释放荧光信号。利用荧光定量PCR仪对PCR过程中相应通道信号进行实时监测和输出,实现检测结果的定性分析。
六、组成:
RT-PCR反应液、混合酶液、阳性对照、阴性对照。
七、样品DNA的制备
用自选方法提取Cps DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PGR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
制备Cps标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DN段作为阳性对照。
1、标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。
2、用带芯枪头分别加入45μL超纯水(最好用带芯枪头,下同)
3、先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或超纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至0E7拷贝/μL)
4、在6号管中加入5μL10E7拷贝/uL的Cps阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照.
八、技术参数
1、符合行业标准SN/T1686-2005《新城疫病毒中强毒株检测)法:荧光RT-PCR法》的检测要求,可用于禽肉、禽类组织脏器禽类排泄和分泌物,及其泄殖腔和咽喉拭样中新城疫病毒的检测。
2、灵敏度:对于接种的鸡胚尿囊液,检测的zu高稀释度可达0-8~10-7,与鸡胚病毒分离方法的灵敏度接近。定量检测线性范围可达10-1010拷贝/ml。
3、特异性:采用新基因序列数据库设计,并通过系统验证新城疫病毒RT-PCR能够检测所有已知新城疫病毒毒株。对于其它禽类感染因子,本试剂盒检测结果为阴性
4、产品盒组成:(不包括新城疫病毒RNA提取试剂,用户可采用通用型病毒RNA提取试剂盒或试剂盒推荐的提取方法。)
组成成份(48T/kit)
1、RNA提取液30ml 1瓶
2、DEPC水5ml 1瓶
3、新城疫病毒RT-PCR一步法反应液 920u|1管
4、逆转录酶(5U/ul)
5、使用说明书一份